會員登錄
當前位置_|银河战士融合金手指:解決方案

HRM法基因定性分析原理

發布日期_|头顶锅盖身披麻袋:2016年09月18日   瀏覽次數15549

    基因的定性分析___青岛往事下载,就是指諸如單核苷酸多態性(SNP)分析|__沈阳酷狗俱乐部、基因突變分析|_仲博彩票手机APP安卓版、純合子篩查等基因分析方法||-198注册。與基因的定量分析不同|-|金枝玉叶花卉,定性分析大多無需知道基因的表達量--永盛彩票导航,而是需要了解樣本中目的基因的序列_|运盛彩票玩法。傳統的基因定性分析可用Southern Blot||-铁道兵战友网、PCR_|_我要一个身份证、DGGE_相信未来朗诵、RFLP和測序等方法|_-瑞丽裳电子杂志,但是這些方法要麼耗時較長___南通开沙岛,要麼通量較低||_联想20003,要麼精度不夠-|陶然是谁。高通量測序及基因芯片技術雖然能夠滿足高精度--青海卫视 湖南卫视、高通量的檢測要求_|中奖身份证号码,但是對於隻針對特定位點的研究來說成本較高_云顶平台是真是假。長久以來___三菱suv,科研人員都在尋找一種簡便而精確的||盈彩可靠吗、可在實驗室操作的基因定性分析方法_老歌听不完。

    雖然熒光定量PCR是應基因定量的要求而發展出來的技術_11086现金棋牌下载地址,但是隨著化學等其他學科的進步-_洛克王国蕾纳斯,現今利用熒光定量PCR技術進行基因的定性研究已經成為現實|命运歌词。與傳統方法相比-|11选5免费计划软件,利用熒光定量PCR檢測基因序列更加準確和高效|-nba2k online 外挂,在目前的基因定性分析中有著越來越廣泛和深入的應用__-温州新城站订票电话。

    最先應用於定性檢測的是熒光探針-|-长沙黄花机场到火车站。因為熒光探針的分辨率高_1分钟快三坑人的,能夠區分單堿基差異_|sepintang,適合SNP或者基因突變的檢測|-腾讯qq人工服务电话。根據特定位點的兩種不同序列設計兩種不同的探針__粤语输入法,分別用兩種熒光標記-_长城h8事件,再對目的樣本進行熒光定量PCR檢測--中国今天9点向日本开炮,由兩種熒光信號的比例即可計算不同序列的含量和比例-|-杨家将之战彭城。然而|__迪吧现场图片,熒光探針合成麻煩_-车膜网、周期長_||许宗衡简历、成本高___金兰妃,與測序相比試驗周期和成本並未明顯降低__注册银彩app。所以_-|亿发彩票官方网站,人們一直尋找利用熒光染料進行基因定性檢測的可能-__兰州摸吧。飽和染料的發現|_打屁屁视频家法,以及隨之誕生的高分辨率熔解(High Resolution Melting--_爱财部落,HRM)分析方法-|盈盈彩票坑客户,為染料法基因定性分析提供了基礎_-|银河彩票网址。

    常用的熒光染料(如SYBR Green等)在濃度高的時候會對PCR過程產生抑製--老师给学生的毕业赠言,所以在熒光定量實驗時的使用濃度較低||_亿发彩票是诈骗平台吗。此時__好易购电视购物网站,染料不能占據DNA雙鏈上的所有的位置_瓦楞纸规格,換句話說|||球衣堂,染料與DNA的結合是不飽和的_|_1q币购物券怎么用。這些染料稱為“非飽和染料”-金池 后知后觉。當製作熔解曲線時--synergykm,隨著溫度的上升_丽谯楼,雙鏈逐漸解鏈-鑫龙墙画,染料會從已解開的單鏈上脫落-_-72街返利网,然後結合到臨近的尚未解鏈的雙鏈中沒有染料的小溝上去|-7k77k小游戏,繼續發出熒光|--阿荣旗吧。這種現象稱作染料的“重排”(圖1)|--长寿益民网。重排導致在較小的溫度變化範圍內|好听的行会名,雖然DNA雙鏈的解鏈程度不同-_陈丽华前夫离婚原因,但熒光值是幾乎不變的_|蘑菇街首页2013;也就是說|_|众赢彩票娱乐平台,熔解曲線不能精確反應雙鏈的解鏈情況_|盈彩网靠谱吗。所以_|易旺彩票骗局,對於非飽和染料---班主任自我介绍,其熔解曲線分辨率相對較低-|11选五复式价格,隻能區分特異性或非特異性的產物_-|镇元大仙的诨号,不能分辨單堿基的差異导电铝浆。

    與此相對___剧场版奥特曼,另外一些熒光染料如LC Green||_云购彩票是骗局吗、Eva Green等_|天天热播网,對PCR的過程無抑製_|诺基亚6120c手机软件下载,所以在體係中可以以高濃度存在||_瑟银矿哪里多。此時_-陈公博,DNA雙鏈中的所有可結合位點內都會有染料分子存在-__3cp彩票官网,染料與DNA的結合呈飽和狀態-__q币购物券有什么用,所以這種染料稱為“飽和染料”|_长阳国际城业主论坛。在溫度上升-基督教歌曲、雙鏈解鏈_|3218彩城、染料脫離的過程中_众发娱乐是传销吗,未解鏈的雙鏈部分不存在染料可以結合的位點||093彩票计划,染料不能發生重排_-_360彩票网购彩大厅官方。所以_-宏伟租房,使用飽和染料製作的熔解曲線分辨率很高|-印度电视剧新娘之无悔的爱,可以精確反映DNA雙鏈隨著溫度的解鏈情況_至尊彩安下载安装苹果,不同熔解曲線的形狀就代表了不同的序列_|中国军衔等级胸章,精度可以達到單堿基差異的區分_-胡静雨。

 
圖1. 非飽和染料(如SYBR Green)的“重排”現象導致在溫度變化幅度小_-|韩版棒针毛衣外套、雙鏈部分變性時-__长三角区域规划,熒光信號無明顯變化_-244影城。而飽和染料則沒有重排現象_-_注册送18元的彩票App,能夠分辨單堿基差異--保定保洁公司信誉放心。

    采用飽和染料的HRM分析方法與探針法相比消除了背景信號|_-抗战奇侠2,靈敏度進一步提高|-锰钢属于;同時众亿彩票,實驗設計更加方便|--078彩票彩规律,操作更加簡單_|_项目投资计划书范文,也無需合成和使用不同的熒光探針_|-银尖宝戟,調試時間更短_掌上彩票安卓版,實驗成本也更低__-阳新县邮编,非常適合對於特定多態位點的實驗室檢測__248彩票安卓版免费。
    根據HRM分析的這些特點和要求_||强心脏20110823,TIANGEN開發了HRM分析試劑盒(FP210)-_歌厅演艺。該試劑盒采用Eva Green飽和染料-||辉县天气2345,使用抗體修飾的熱啟動DNA聚合酶及精心優化的緩衝體係__佳俊车行,增加反應的特異性和熔解曲線的穩定性_-易旺彩票网安全吗,具有高分辨率和高模板適應性的特點__皇女的踪迹,特別適用於已知SNP分析-|-众购彩票网址多少、未知SNP篩選-__11选五投注平台亿博、突變基因掃描和甲基化研究等基因定性分析研究(圖2)__108娱乐彩票正规吗。


 
圖2. 使用TIANGEN血液基因組DNA提取試劑盒(DP318)提取100 μl人類血液樣本中的基因組DNA|-|0717com彩票官方版,以HRM分析試劑盒(FP210)進行PCR檢測|_|湖南电视台电视剧。檢測24個不同個體|cf修复工具,使用體係為20 μl-|_长春艺术实验中学,模板量為50 ng__-云顶彩票送45。結果顯示||lenovoa60软件,相同基因型熔解曲線重複性高__qq游戏商城网址,不同基因型分辨明確|民办教育促进法,不存在誤判-高中班主任寄语。可以看到|阿鲁科尔沁绿源网,TIANGEN的HRM分析試劑盒是進行SNP檢測的理想試劑|_亿彩网安卓版。

檢測的SNP信息如下|-|盈彩聊天室:
RefSNP number-_|008彩票平台靠谱吗:rs174538
Gene Name_--红米手机缺点:FEN1(flap structure-specific endonuclease 1)
序列-_|靖州红网:CGCTCCGCCACCGGAAGAACACGTCG[A/G]CAGGAGCAGGCGCCTAGCACAACCG
Allele Frequency-卓易彩票是正规网站吗:A=0.314 G=0.686
根據該SNP位點兩側序列信息_|阿里魔战,設計引物|_|自由们7 39下载:
FEN1_F-||酒包装设计:CCTCAACGCTCTCACCATTTTG__|168彩票能不能投注;FEN1_R__安全性能综合测试仪:GGCACTTCCTTTTCCGGTTGTG
擴增PCR產物長度為108 bp_|-指险套。
使用儀器為Roche LightCycler 4802000年彩票大奖,收集熔解曲線的參數為-_东汉书院校歌:Ramp Rate 0.05-_长城干红1994价格,Acquisitions 12__暖流作文,用Gene scanning的方法分析|四家中乙队欠薪。

地址|_-优乐彩票可靠吗:北京市海澱區西小口路66號東升科技園(北領地)C7-3 電話-_35彩票黑钱:800-990-6057
京ICP備14016832   京公網安備11010802015827  天根生化科技(北京)有限公司 © 版權所有